Ūdeņraža peroksīda dezinfekcijas un sterilizācijas rezultātu uzraudzība un pārbaude bioloģiskās drošības skapjos

Pēc ūdeņraža peroksīda (īpaši iztvaicētā ūdeņraža peroksīda VHP) izmantošanas dezinfekcijai un sterilizācijai bioloģiskās drošības skapjos, stingra un zinātniska uzraudzība un rezultātu pārbaude ir vienīgais veids, kā apstiprināt sterilizācijas efektivitāti, kā arī kvalitātes kontroles pamatprasības un normatīvo aktu atbilstību. Tas nav vienkārši “ierīces palaišanas” process, bet gan slēgts-cikla process, kam nepieciešami vairāki fizikāli, ķīmiski un bioloģiski pierādījumi.
Tālāk ir sniegta sistemātiska uzraudzības un apstiprināšanas metožu analīze.
Pamatprincips: trīskāršā verifikācijas sistēma
Pilnīgai validācijai jāietver "procesa parametru uzraudzība", "ķīmiskie indikatori" un "bioloģisko indikatoru izaicinājumu pārbaude", kas visi papildina viens otru un ir neaizstājami.

Šī ir pirmā aizsardzības līnija verifikācijai, kas ietver galveno fizisko un ķīmisko parametru reāllaika reģistrēšanu, izmantojot ierīces sensorus, pierādot, ka sterilizācijas cikls darbojas iestatītajā un efektīvajā parametru diapazonā.
Monitoringa parametri:
Ūdeņraža peroksīda tvaiku koncentrācija (ppm): vissvarīgākais parametrs. Tas ir jāsasniedz un jāsaglabā iepriekš noteiktā mērķa koncentrācijā (piemēram, simtiem ppm) pietiekami ilgu laiku. Zema koncentrācija var izraisīt sterilizācijas neveiksmi.
Relatīvais mitrums (% RH): kontrolēts zemā līmenī (parasti).<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Temperatūra: uzraugiet kameras temperatūru, kas ietekmē piesātinātā tvaika spiedienu un kondensācijas procesu.
Spiediens/gaisa plūsma: pārliecinieties, ka kamera ir noslēgta un gāzes cirkulācija ir normāla.
Ekspozīcijas laiks: ilgums, kas tiek uzturēts mērķa koncentrācijā.
Kā izpildīt:
Automātiski aizpilda VHP ģeneratorā iebūvētie sensori un vadības sistēma.
Galvenā prasība. Iekārtai jāspēj ģenerēt un saglabāt pilnīgus cikliskus datu grafikus (koncentrācijas laika līkni, temperatūras un mitruma līkni), kas jāiekļauj validācijas ziņojumā. Jebkurai parametra novirzei no iepriekš iestatītā diapazona ir jāizraisa trauksme vai cilpas pārtraukšana.

Izmanto, lai ātri un intuitīvi noteiktu, vai prece ir pakļauta ūdeņraža peroksīda sterilizācijas videi, un var netieši atspoguļot, vai deva ir pietiekama.
Veids un princips:
Etiķetes tipa ķīmiskā indikatora karte: Satur krāsvielas, kas ir jutīgas pret ūdeņraža peroksīdu. Kad tiek uzkrāts pietiekams daudzums ūdeņraža peroksīda devas (koncentrācija x laiks), notiek neatgriezeniskas izmaiņas no vienas krāsas uz otru.
Izvietošanas vieta: tā jānovieto visgrūtāk sasniedzamā sterilizācijas vietā, piemēram:
Seifa skapja darbvietas dziļākais stūris.
Drenāžas kanāla iekšpusē.
Savienojums starp filtru un uzstādīšanas rāmi (ja iespējams).
Iekšējā izplūdes caurule (ja tā ir pārklāta ar dezinfekciju).
Funkcija un ierobežojumi:
Funkcija: nodrošina tūlītējus rezultātus ātrai atbrīvošanai; Apstipriniet, ka tvaiks ir izdalīts norādītajā vietā; Kā identifikators, lai atšķirtu "apstrādātus" un "neapstrādātus" vienumus.
Ierobežojumi: var pierādīt tikai iedarbību, nevar pierādīt sterilitāti. Krāsas maiņa tikai norāda, ka ir sasniegts minimālās devas slieksnis, bet negarantē visu mikroorganismu iznīcināšanu.

Tas ir pārbaudes un izšķirošo pierādījumu zelta standarts. Izmantojot standartizētas mikrobu sporas ar zināmu augstu rezistenci, tiek tieši pierādīts, ka sterilizācijas process ir pietiekams, lai iznīcinātu visgrūtāk iznīcināmos mikroorganismus.
Bioloģisko indikatoru izvēle:
Standarta celms: Geobacillus stearothermophilus sporas. Šī ir starptautiski atzītā standarta testa baktērija ar spēcīgāko rezistenci pret ūdeņraža peroksīdu.
Nesēja forma: parasti sporu suspensijas pilienu notraipīta papīra sloksne, nerūsējošā tērauda loksne vai uzstādīta uz noteikta nesēja.
Zināmais sporu skaits: katrs bioloģiskais indikators satur zināmu sporu skaitu, parasti no 10 ^ 5 līdz 10 ^ 6 KVV (koloniju veidojošās vienības).
Izvietojuma stratēģija (viskritiskākais solis):
Atrašanās vieta: tas jānovieto "vēsākajā vietā", kur sterilizācija ir visgrūtāk vai kur ir visgrūtāk iekļūt gāzei. Bioloģiskās drošības skapjiem ieteicamās atrašanās vietas ir šādas:
Zem darbagalda, stūrī pie priekšējā režģa.
Savienojums starp aizmugurējo sienu un darbagaldu.
Uz muguras vai iekšējo instrumentu, piemēram, pipešu turētāju, spraugās.
Ja verifikācijas joma ietver izplūdes vārsta vai cauruļvada iekšpusi.
Daudzums: izmantojiet vismaz 3 bioloģiskos indikatorus un iekļaujiet vienu neapstrādātu pozitīvo kontroli.
Pārbaudes un interpretācijas process:
Ekspozīcija: veiciet pilnu VHP sterilizācijas ciklu ar BI skapi.
Pārstrāde un audzēšana:
Kad cikls ir pabeigts, noņemiet BI sterilos apstākļos.
Ievietojiet to īpašā reģenerācijas mēģenē, kurā ir barotne.
Kultivē 56-60 grādu C inkubatorā 24-48 stundas (konkrēts laiks saskaņā ar instrukciju).
Vienlaicīgi kultivējiet pozitīvo kontroli (nesterilizētu) un negatīvo kontroli (sterilu barotni).
Rezultāta interpretācija:
Pārbaude ir veiksmīga: visas sterilizētās BI barotnes paliek skaidras (nav krāsas maiņas/duļķainības), kas liecina, ka sporas nav izdzīvojušas. Pozitīvajai kontrolei ir jāuzrāda aktīva augšana (barotnes dzeltēšana/duļķainība), un negatīvajai kontrolei jāpaliek skaidrai.
Pārbaudes kļūme: jebkurš apstrādāts BI, kas parāda augšanu (dzeltenību/duļķainību), norāda uz sterilizācijas cikla kļūmi. Ir rūpīgi jāizpēta iemesli (piemēram, parametru kļūdas, izvietojums, aprīkojuma darbības traucējumi, blīvējuma problēmas utt.), jāpielāgo plāns un vēlreiz jāveic pilnīga pārbaude.

Pirmā pārbaude:
Pēc VHP aprīkojuma uzstādīšanas vai jauna tipa drošības skapja sākotnējās sterilizācijas tā ir jāveic.
Šī ir visplašākā pārbaude, kas prasa noteikt “aukstāko punktu” un noteikt efektīvus cilpas parametrus.
Regulāra atkārtota apstiprināšana:
Parasti to veic reizi sešos mēnešos vai reizi gadā.
Izmanto, lai apstiprinātu aprīkojuma, programmu un operatoru konsekvenci.
Ikdienas uzraudzība:
Katram sterilizācijas ciklam jāizmanto ķīmiskie indikatori, un jāpārskata procesa parametru kartes.
Bioloģisko indikatoru testēšanas biežumu var pēc vajadzības samazināt (piemēram, reizi mēnesī vai ceturksnī), taču apgabalos ar stingriem noteikumiem var būt nepieciešams izmantot katru partiju/ciklu.

Visas uzraudzības un pārbaudes darbības ir oficiāli jādokumentē, un ziņojumā jāiekļauj vismaz:
Informācija par aprīkojumu: VHP ģeneratora modelis un numurs.
Informācija par mērķa ierīci: Biosafety skapja modelis, numurs, atrašanās vieta.
Cilpas parametri: iestatītā mērķa koncentrācija, laiks, temperatūra un mitrums utt.
Procesa datu grafiks: faktiskās darbības koncentrācijas laika līkne utt.
Ķīmiskie indikatori: veids, partijas numurs, izvietojuma vieta, krāsu maiņas rezultāti (ar pievienotām fotogrāfijām).
Bioloģiskie indikatori: celms, partijas numurs, sporu daudzums, ievietošanas vieta, kultivēšanas rezultāti (pievienoti ar kultūras mēģenes fotogrāfijām).
Secinājums: skaidri nosakiet, vai sterilizācijas cikls ir efektīvs.
Izpildītājs un datums: operatora un recenzenta paraksts.

kopsavilkums
Nesterilizēta sterilizācija ir līdzvērtīga nesterilizācijai.
Uzticama validācijas sistēma ūdeņraža peroksīda dezinfekcijai un bioloģiskās drošības skapju sterilizācijai ir:
Nodrošiniet procesa kontroli, izmantojot "procesa parametru kartēšanu", panākiet ātru vizuālu izlaišanu, izmantojot "ķīmiskos indikatorus", un galu galā iegūstiet mikrobioloģiskās maksimālās efektivitātes sertifikātu, izmantojot "bioloģisko indikatoru izaicinājumu testēšanu".
Šī trīskāršā validācijas sistēma ir atslēga, lai ūdeņraža peroksīda dezinfekciju no "operācijas" padarītu par izsekojamu, reproducējamu un uzticamu "zinātni", un tā ir arī stūrakmens GLP, GMP un bioloģiskās drošības laboratoriju akreditācijas prasību izpildei gan mājās, gan ārvalstīs. Laboratorijas vadītājiem tas ir jāievieš kā obligāta procedūra un nepārtraukti jāuzrauga.